提取RNA可以不用氯仿了?Takara為您帶來(lái)了RNAiso Easy | ||||||||||||
憑借著(zhù)良好口碑、親民價(jià)格,Takara RNAiso Plus在中國市場(chǎng)暢銷(xiāo)多年,陪伴無(wú)數科研工作者開(kāi)啟了成功的實(shí)驗。 經(jīng)過(guò)不停探索,不斷精進(jìn),2024年初,萬(wàn)眾期待的Takara無(wú)需氯仿的RNA提取試劑RNAiso Easy成功問(wèn)世——無(wú)需氯仿,安全高效,全程室溫,單相提取,操作簡(jiǎn)單;使Takara的RNA提取品目更加豐富多彩,熠熠生輝。 |
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無(wú)需氯仿的RNA提取試劑—RNAiso Easy | ||||||||||||
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RNAiso Easy用于從動(dòng)物組織、植物材料、各種微生物、培養細胞等樣品中提取Total RNA。 在加入Solution H離心后,溶液會(huì )形成上清層及沉淀層,RNA分布在上清層中,收集上清層,經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到Total RNA。 |
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? 單相提取,無(wú)需多相分層 ? 全程可在室溫進(jìn)行操作 ? 安全低毒,操作過(guò)程中無(wú)需使用氯仿 ? 操作簡(jiǎn)單,1 h內即可完成Total RNA提取 ? 提取的RNA完整性好,純度高,基本不含gDNA污染,可用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗 |
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1. 比肩經(jīng)典,樣本多元 |
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(1)Total RNA提取質(zhì)量檢測 試劑:Takara經(jīng)典的提取試劑RNAiso Plus(Code No. 9108)、無(wú)需氯仿的新產(chǎn)品RNAiso Easy(Code No. TCH020) 樣品:293細胞、小鼠肝臟細胞 電泳上樣量:500 ng 結果顯示,RNAiso Easy具有與RNAiso Plus相當的RNA提取性能。 |
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? 電泳檢測:1% TAE Agarose Gel電泳 |
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? RNA 完整度檢測 |
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(2)RT-qPCR 檢出性能檢測 RNA提取試劑:Takara經(jīng)典的提取試劑RNAiso Plus(Code No. 9108)、無(wú)需氯仿的新產(chǎn)品RNAiso Easy(Code No. TCH020) 樣品:小鼠腦組織 RNA起始量:500 ng/rxn total RNA |
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RT-qPCR試劑: 1-step RT-PCR RR066 One Step TB Green® PrimeScript? RT-PCR Kit; 2-step RT-PCR RR037 PrimeScript? RT reagent Kit ,RR820 TB Green® Premix Ex Taq? II 擴增基因:B2m基因 結果顯示,RNAiso Easy提取的RNA具有與RNAiso Plus提取的RNA相當的RT-qPCR檢出性能。 |
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? 1-step RT-qPCR檢測 |
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? 2-step RT-qPCR檢測 |
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(3)多種樣本RNA提取性能檢測 使用RNAiso Easy分別提取動(dòng)物組織、植物組織及細胞樣本的Total RNA,均取500 ng Total RNA進(jìn)行電泳檢測。 結果顯示,A260/A280均在1.9-2.0之間,RNAiso Easy適用于不同類(lèi)型樣品的Total RNA提取,產(chǎn)物純度高,完整性好。 |
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? 電泳檢測:1% TAE agarose gel,λ Hind III digest Marker |
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2. 同類(lèi)比較,性能更佳 |
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(1) Total RNA提取質(zhì)量檢測對比 試劑:RNAiso Easy、A公司產(chǎn)品、B公司產(chǎn)品、C公司產(chǎn)品 樣品:小鼠肌肉、293細胞、向日葵幼苗葉片 結果顯示,RNAiso Easy提取的RNA收量高、RIN值高于大部分同類(lèi)產(chǎn)品; RNAiso Easy的提取性能優(yōu)于其他公司同類(lèi)產(chǎn)品。 |
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a.小鼠肌肉樣本提取性能檢測 ? RNA收量 |
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? RIN值檢測 |
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b. 293細胞樣本提取性能檢測 ? RNA收量 |
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? RIN值檢測 |
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c. 向日葵幼苗葉片樣本提取性能檢測 ? RNA收量 |
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? RIN值檢測 |
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(2)提取的Total RNA的RT-qPCR檢出性能對比 RNA提取試劑:RNAiso Easy、A公司產(chǎn)品、B公司產(chǎn)品、C公司產(chǎn)品 樣品:小鼠腦組織 RNA起始量:500 ng/rxn total RNA 反轉錄試劑:RR037 PrimeScript? RT reagent Kit qPCR試劑:RR820 TB Green? Premix Ex Taq? II 擴增基因:B2m基因 結果顯示,相同RNA起始量進(jìn)行RT-qPCR,RNAiso Easy提取的RNA檢出Ct值更小,說(shuō)明RNAiso Easy提取RNA的性能優(yōu)于三款同類(lèi)產(chǎn)品。 |
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(3)提取的Total RNA的長(cháng)片段RT-PCR擴增性能對比 RNA提取試劑:RNAiso Easy、RNAiso Plus、A公司產(chǎn)品、B公司產(chǎn)品、C公司產(chǎn)品 樣品:小鼠肝臟、小鼠腦組織 RNA起始量:500 ng/rxn total RNA 反轉錄試劑:RR014 PrimeScript? RT-PCR Kit PCR試劑:Premix Taq? (LA Taq? Version 2.0) 擴增基因:Dnch1 結果顯示,RNAiso Easy提取的RNA在長(cháng)片段RT-PCR性能上,與RNAiso Plus相當,并且性能好于3款其他公司的同類(lèi)產(chǎn)品。 |
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? 電泳檢測:1% TAE agarose gel,λ Hind III digest Marker |
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12 kb片段擴增檢測——小鼠肝臟RNA |
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12 kb片段擴增檢測——小鼠腦組織RNA |
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3. 產(chǎn)物不染,品質(zhì)上乘 |
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(1)提取的RNA不含RNase污染 使用RNAiso Easy提取的RNA樣品37℃溫育過(guò)夜,與-80℃保存后進(jìn)行電泳檢測 結果顯示,提取的RNA經(jīng)37℃溫育過(guò)夜后,電泳檢測條帶沒(méi)有發(fā)生降解,說(shuō)明RNAiso Easy提取的RNA中不含RNase污染。 |
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? 電泳檢測:1% TAE agarose gel,DL2,000 DNA Marker |
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(2)提取的RNA不含gDNA污染 模板:500 ng/rxn Mouse liver total RNA 試劑:RR014 PrimeScript? RT-PCR Kit 結果顯示,不添加RTase的PCR反應無(wú)擴增產(chǎn)物,說(shuō)明RNAiso Easy提取的RNA中不含gDNA污染。 |
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? 電泳檢測:3% TAE agarose gel,100 bp DNA Ladder Marker |
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(本文內實(shí)驗數據均來(lái)源于Takara Bio Inc.比較數據) |