HQ級別T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase, HQ
2024-03-04文章來(lái)源：takarabio
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■ 制品內容（Code No. 2542A）
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T7 RNA Polymerase, HQ (200 U/μl)
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200,000 U
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10×IVT Reaction Buffer, HQ
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10 ml
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■ 制品說(shuō)明
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T7 RNA Polymerase, HQ (high quality)是一種可用于基礎研究的產(chǎn)品，用于制備非臨床試驗的醫藥品原藥、開(kāi)發(fā)符合GMP指南的醫藥品制造工藝以及開(kāi)發(fā)RNA藥物等。本產(chǎn)品的終反應液中，不含人或動(dòng)物源性成分以及β內酰胺類(lèi)化合物。
本酶具有與T7 RNA Polymerase ver.2.0（Code No. 2541A）同等的性能，且能夠以含有T7啟動(dòng)子序列的雙鏈DNA為模板，以NTP為基質(zhì)，通過(guò)轉錄啟動(dòng)子下游區域，在體外合成單鏈RNA。與附帶的反應緩沖液（10X IVT Reaction Buffer, HQ）配合使用時(shí)，可大量制備高質(zhì)量的RNA，適用于RNA醫藥領(lǐng)域的研發(fā)。
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■ HQ級別品質(zhì)
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本產(chǎn)品的終反應液中，不含人或動(dòng)物源性成分以及β內酰胺類(lèi)化合物。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 起源
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Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase
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■ 性質(zhì)
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1. 分子量：約99.8 kDa
2. 輔因子：Mg2+
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■ 活性定義
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在37℃條件下，1小時(shí)內生成0.5μg的1.9kb FLuc RNA所需的酶量定義為1個(gè)活性單位（U）。
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■ 用途
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1. 合成RNA，用于酶的帶帽結構
2．合成基于Cap analog帶帽結構的mRNA
3．長(cháng)鏈非編碼RNA（Long non-coding RNA）的合成
4．向導RNA（guide RNA）的合成
5．siRNA前體的合成
6．用于RT-qPCR的RNA標準模板的合成
7．高特異性RNA探針的合成
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■ 使用注意
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1. 請勿劇烈攪拌本酶。
2. 當dsDNA模板、試劑、試管或微量移液器槍頭被RNase污染時(shí)，合成的RNA產(chǎn)量會(huì )降低或者出現片段化。在實(shí)驗過(guò)程中應采取預防措施以避免RNase污染，例如戴一次性手套和使用專(zhuān)門(mén)用于RNA實(shí)驗的試管和微量移液器槍頭。
3. 為合成長(cháng)度均等的RNA，可將含有T7啟動(dòng)子的線(xiàn)性化質(zhì)?；騊CR產(chǎn)物等作為DNA模板來(lái)使用。理想的線(xiàn)性化模板末端應為5’-突出或平端。
4. 高質(zhì)量10×IVT Reaction Buffer含有亞精胺。亞精胺與核酸形成復合體，在某些情況下可能產(chǎn)生沉淀，因此模板DNA應在加酶之前即倒數第二步再加入反應體系中。
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