定量PCR專(zhuān)用快速反轉錄試劑PrimeScript? FAST RT reagent Kit with gDNA Eraser
2024-03-04文章來(lái)源:takarabio
*紅字為促銷(xiāo)價(jià)格,促銷(xiāo)時(shí)間: 2024年3月1日-2024年4月30日 ,一次性訂購RR092A≥10包,每包僅需600元。
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■ 制品內容 (Code No.: RR092A: 20 μl反應×100次量)
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Code No. RR092S
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RR092A
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1. 8X gDNA Eraser Premix*1
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80 μl
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200 μl
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2. 5X RT Premix*2
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160 μl
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400 μl
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3. RNase Free H2O
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1 ml
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1 ml×2
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4. EASY Dilution II(for Real Time PCR)*3、4
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1 ml
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1 ml
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*1:8X gDNA Eraser Premix成分是后續反轉錄反應所必需的,請務(wù)必進(jìn)行基因組DNA的除去反應。含有RNase Inhibitor。
*2:含有dNTP mixture、Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*3:制作標準曲線(xiàn)時(shí)梯度稀釋total RNA和cDNA的稀釋液。如果用水或TE Buffer稀釋?zhuān)荒軠蚀_地進(jìn)行稀釋?zhuān)褂肊ASY Dilution II (for Real Time PCR) 時(shí),即使稀釋至低濃度也能夠進(jìn)行準確地稀釋。請注意,本制品不影響反轉錄和PCR反應,用其稀釋后的樣品可直接使用。
*4:可以單獨購買(mǎi)EASY Dilution II (for Real Time PCR) (Code No. 9451)
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■ 制品說(shuō)明
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PrimeScript FAST RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因組DNA進(jìn)行Real Time RT-PCR反應的專(zhuān)用反轉錄試劑。試劑盒中使用了具有較強DNA分解活性的gDNA Eraser,42℃,2 min即可除去基因組DNA,之后添加含有完全抑制DNA分解活性成分的反轉錄反應試劑,進(jìn)行10分鐘的反轉錄反應。由于基因組去除試劑和反轉錄反應試劑預先進(jìn)行了預混化,因此,通過(guò)向RNA樣品中依次添加試劑的簡(jiǎn)便操作,可以毫無(wú)損失地進(jìn)行從基因組DNA去除到cDNA合成的反應。
本試劑盒尤其適用于存在基因組殘留問(wèn)題的Real Time RT-PCR分析,例如無(wú)法設計合適引物的單外顯子基因或沒(méi)有大內含子的基因,以及由于假基因的存在無(wú)法避免基因組來(lái)源的非特異性擴增時(shí)。
使用本制品合成的cDNA適用于嵌合熒光法和探針?lè )╭PCR分析??梢愿鶕?shí)驗目的,選擇與TB Green® Premix Ex Taq? II FAST qPCR(Code No. CN830S/A)、TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 、Probe qPCR Mix, with UNG (Code No. RR392S/A/B)等定量PCR試劑組合使用。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 特長(cháng)
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1. 在短短15分鐘內完成從去除基因組DNA到cDNA合成的反應。
2. 只需依次添加預混試劑的簡(jiǎn)便操作,即可進(jìn)行反應。
3. 通過(guò)單管反應可以從模板RNA中毫無(wú)損失地合成cDNA。
4. Random 6 mers和Oligo dT Primer作為反轉錄引物,預先包含在5X RT Premix中,可以均勻地合成RNA的全部區域。
5. 本制品中附加了標準曲線(xiàn)制作用稀釋液EASY Dilution II(for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準確稀釋?zhuān)菀自趯拸V范圍內獲得準確定量的標準曲線(xiàn)。
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■ 使用注意
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1.使用本制品合成的cDNA與TB Green關(guān)聯(lián)制品組合使用時(shí),建議使用以下TB Green Premix系列。
與本制品組合使用,可以得到可信度高的結果。
TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR(Code No. CN830S/A)
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
本制品與TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 組合使用時(shí),有時(shí)反應性能不好,不推薦使用。
2.8X gDNA Eraser Premix和5X RT Premix前在使用前需顛倒混勻,輕輕離心后使用。
3.分裝試劑時(shí)務(wù)必使用新的槍頭(Tip),以防止樣品間污染。
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