快速qPCR試劑TB Green? Premix Ex Taq? II FAST qPCR
2023-08-17文章來(lái)源：takarabiomed
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
■ 制品內容 (CN830S：25 μl反應×80次、CN830A：25 μl反應×400次)
|
|
|
Code No.
|
CN830S
|
CN830A
|
|
TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR（2X）*1
|
|
1 ml × 1
|
1 ml × 5
|
|
EASY Dilution II（for Real Time PCR）*2
|
|
1 ml × 1
|
1 ml × 3
|
|
|
*1 內含突變型Taq HS，dNTP Mixture，Mg2+，Tli RnaseH、Uracil DNA Glycosylase(UNG)，heat-labile、通用參比染料、可視化色素和TB Green。
*2 在逐步稀釋total RNA和cDNA時(shí)，將其用作稀釋溶液。如果用水或TE稀釋?zhuān)赡軣o(wú)法進(jìn)行準確稀釋?zhuān)褂肊ASY Dilution II（for Real Time PCR）可以準確稀釋至低濃度，并在寬廣的范圍內獲得準確定量的標準曲線(xiàn)。請注意，此緩沖系統不會(huì )影響反轉錄或PCR的反應性。稀釋的模板溶液可以直接用作反轉錄反應或PCR反應的模板。
注：請勿使用EASY Dilution（for Real Time PCR）（Code No. 9160）稀釋本制品。
|
|
|
|
|
Limited Use Label License：[M82]
|
|
|
|
■ 制品說(shuō)明
|
本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專(zhuān)用試劑。本制品將適用于快速PCR反應的突變型Taq DNA聚合酶和抑制引物二聚體的因子組合，優(yōu)化了反應液組成，在保證特異性的同時(shí)，實(shí)現快速PCR反應和在寬廣的動(dòng)態(tài)定量區域內對靶基因進(jìn)行準確定量、檢測，重復性好。此外, 2X Premix試劑中，已預先添加了Tli RNaseH（耐熱性RNaseH）和UNG，以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應時(shí)，Tli RNaseH可以很好地抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應造成的阻害作用，UNG可避免擴增過(guò)程中的交叉污染。
本制品是2X濃度的Premix型試劑，預先混有通用參比染料和可視化色素，無(wú)需額外在儀器中添加參比試劑以校正孔間熒光信號，可視化色素可以最大限度地減少操作錯誤。
|
|
|
|
■ 保存
|
4℃。
|
|
注意：
|
4℃可保存3個(gè)月。
|
|
|
避光保存，避免污染。
|
|
|
長(cháng)期保存請置于-20℃，一旦開(kāi)始使用請于4℃保存并在3個(gè)月之內使用完。
|
|
|
|
■ 試劑盒特長(cháng)
|
1. 通過(guò)Real Time PCR反應，可以快速、準確地對目的基因進(jìn)行檢測、定量。
2. 本制品是預先混有TB Green的2X 濃度的Premix試劑，只需加入引物、模板、滅菌水便可通過(guò)嵌合熒光檢測法進(jìn)行Real Time PCR反應。
3. PCR反應使用的是可進(jìn)行快速PCR反應的突變型Taq HS。緩沖buffer結合了引物二聚體抑制因子，適用于實(shí)時(shí)PCR。最大限度的抑制了引物二聚體的形成，可以在較短的延伸時(shí)間內，以高靈敏度的S/N比進(jìn)行檢測。
4. 在2X Premix試劑中，預先添加了耐熱性RNaseH (Tli RNaseH)和UNG，Tli RNaseH可以很好地抑制以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應時(shí)，由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應造成的阻害作用，UNG可避免擴增過(guò)程中的交叉污染。
5. 預先在2X預混試劑中添加了通用參比染料和可視化色素，無(wú)需在儀器中額外添加參比試劑以校正孔間熒光信號。
|
|
|
|
|
|
■ 注意事項
|
以下為使用本試劑盒時(shí)的注意事項，使用前一定認真閱讀。
1. 進(jìn)行Real Time RT-PCR反應時(shí)，反轉錄反應推薦如下試劑。與本制品組合使用，可以得到可信度高的結果。
PrimeScript? RT reagent Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR037Q/A/B)
PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036Q/A/B)
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)（Code No. RR047A/B）
2. 使用前，請上下輕輕顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡，試劑混勻后再使用。試劑混合不均勻會(huì )造成反應效果不佳。
(1) 請勿渦旋振蕩混勻。
(2) TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR (2X)在-20℃保存時(shí)，可能會(huì )產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀?？捎檬治站徛芙?，或于室溫短時(shí)間避光放置后，上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會(huì )導致試劑組份不均勻，必須混勻后再使用。
3. 配制反應液時(shí)，試劑請于冰上放置。
4. 本制品中含有熒光染料TB Green，配制PCR反應液時(shí)應避免強光照射。使用后的TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR (2X) 應立即避光存儲。
5. 反應液的配制、分裝請一定使用新的一次性槍頭、盡量避免樣品間的污染。
|
|
|
|
