跟您聊聊酵母轉化的那些事兒 | |||
做過(guò)酵母雜交實(shí)驗的寶粉應該都有體會(huì ),酵母轉化實(shí)驗是酵母雜交實(shí)驗過(guò)程中一大難點(diǎn),今天就來(lái)和大家嘮扯嘮扯酵母轉化的那些事兒。 在酵母雜交實(shí)驗中,往往培養酵母時(shí)很順利,卻在酵母轉化或者篩選的實(shí)驗中意外敗下陣來(lái)。 Takara有兩款酵母轉化試劑盒可以幫助大家完成實(shí)驗,值得關(guān)注的是,即便您不從事酵母雜交相關(guān)實(shí)驗,但只要涉及到酵母表達,它們都可以幫您解決酵母轉化方面的難題。 |
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酵母轉化試劑盒:630439 Yeastmaker? Yeast Ttransformation System 2 | |||
采用聚乙二醇(PEG)/醋酸鋰方法高效制備并轉化酵母感受態(tài)菌株,適合用于小規?;蛘呶膸煲幠5母咝Ы湍皋D化方法,轉化效率一般為3×105轉化子/μg質(zhì)粒DNA。 | |||
制品特點(diǎn): | |||
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酵母轉化實(shí)驗的注意事項: | |||
1. 建議做對照實(shí)驗; 2. 質(zhì)粒DNA的質(zhì)量一定要高,可以用乙醇再次純化; 3. DMSO、Carrier DNA質(zhì)量要高,最好試劑是新鮮的,Carrier DNA在轉化之前最好用沸水變性; 4. SD培養基pH值應調為5.8,YPDA應調為6.5。如果轉化不成功,重新配制培養基,檢測對照組的轉化效率; 5. 如果BD載體翻譯出來(lái)的融合蛋白質(zhì)對酵母菌有毒性,此時(shí)可以使用低表達BD載體pGBT9。 |
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如果您嫌棄制備酵母感受態(tài)麻煩,還可以使用我們的小規??焖俎D化酵母試劑盒! | |||
簡(jiǎn)便&快速酵母轉化試劑:631851 Quick & Easy Yeast Transformation Mix | |||
正所謂“尺有所短,寸有所長(cháng)”,這款轉化試劑盒雖然不能進(jìn)行文庫級別的酵母轉化,但是,您使用它無(wú)需制備感受態(tài)細胞。它可以用于釀酒酵母或畢赤酵母的小規模轉化,釀酒酵母菌小規模轉化僅需1.5 hr,畢赤酵母轉化操作不超過(guò)30 min,操作簡(jiǎn)便、節省時(shí)間。 | |||
制品特點(diǎn) | |||
· 釀酒酵母的轉化只需1.5 hr,畢赤酵母的轉化只需30 min · 無(wú)需制備酵母感受態(tài)細胞 · 可以轉化在平板上培養1個(gè)月左右的釀酒酵母細胞 |
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與一般酵母轉化試劑的流程對比,小規??焖?/strong> | |||
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不論您正在做酵母雜交實(shí)驗還是酵母表達實(shí)驗,采用以上工具都可以有效解決酵母轉化方面的難題,寶粉請留步,可不興錯過(guò)了??! | |||
酵母轉化實(shí)驗操作視頻: | |||
酵母雙雜交實(shí)驗操作(視頻21分開(kāi)始) |