Streptavidin標記物快速純化柱—Capturem? 膜技術(shù)
2019-04-23文章來(lái)源：Takarabiomed
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Code No.
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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635733
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Capturem? Streptavidin Miniprep Columns
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635734
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Capturem? Streptavidin 96-Well Plate
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■ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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Capturem? Streptavidin——利用鏈霉親和素快速富集和純化生物素化物質(zhì)。
鏈霉親和素是一種來(lái)源于鏈霉菌Streptomyces avidinii的細胞壁蛋白質(zhì)，與生物素有非常強的親和力，這一互作特性在生命科學(xué)領(lǐng)域被廣泛應用于富集等相關(guān)研究。Capturem? Streptavidin mini 純化柱和96-well 純化板是將鏈霉親和素固定在高容量的Capturem膜上，從而在室溫條件下就可以對生物素化的靶標實(shí)現快速、高質(zhì)量的純化和富集，整個(gè)操作從上樣到洗脫僅需5～15分鐘。此外，還可以利用Capturem?Streptavidin來(lái)捕獲或pull down靶標分子或復合物。
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■ 產(chǎn)品特點(diǎn)
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· 簡(jiǎn)單、快速的操作流程：室溫下操作即可，小量純化僅需5 min，96-well板僅需15 min
· 產(chǎn)物濃度高：少量的洗脫液即可實(shí)現高濃度洗脫
· 高質(zhì)量：樣品停留時(shí)間短，從而有效地防止了樣品聚集、失活，或者樣品中復合物解離
· 高重復性：每個(gè)純化柱的純化結果有高度的一致性
· 一次性使用：新型膜技術(shù)搭配一次性離心柱有效降低了污染和殘留的風(fēng)險
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■ 應用
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· 生物素化蛋白質(zhì)的純化或富集
· Pull down與生物素化的配體相結合的蛋白質(zhì)或oligo
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Capturem Streptavidin對不同樣品的載量和操作時(shí)間
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生物素標記的抗體
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生物素標記的BSA
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生物素標記的ssDNA
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游離的生物素
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純化時(shí)間
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Capturem Streptavidin mini純化柱和96-well 純化板
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20-40 μg
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>15 μg
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1,000-1,500 ng
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>4,000 pmol
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15 分鐘
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實(shí)驗例
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例1
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使用Capturem Streptavidin連續三次捕獲抗體。圖A–C.首先將含48 μg生物素化兔IgG的Binding Buffer上樣至平衡好的Capturem Streptavidin spin column中，這時(shí)32.0 ± 1.4 μg (圖B)的抗體被成功固定在膜上。然后洗滌一次，再將使用Binding Buffer稀釋的含20%小鼠血清且同時(shí)加入spiked-in靶抗體（約100 μg山羊抗兔抗體）的雜交瘤培養基加入到Capturem Streptavidin spin column中，分別使用Binding Buffer和PBS先后洗滌兩次，最后使用1.0 M甘氨酸洗脫3次，從生物素化的捕捉抗體上洗脫獲得高純度的靶抗體，收量約為42 ± 5 μg (圖C)。
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例2
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Capturem Streptavidin 96-well純化板具有高度重復性。分別對生物素化oligo（圖A）和生物素化BSA（圖B）進(jìn)行8次技術(shù)重復上樣，并使用離心的方法進(jìn)行靶標捕獲。通過(guò)測定樣品上樣前后的OD值來(lái)對結合的分子進(jìn)行定量。捕獲操作按照標準的流程進(jìn)行，15 min之內完成。
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https://www.takarabio.com/products/protein-research/purification-products/capturem-streptavidin
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