■ 制品說(shuō)明
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Aureobasidin A
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Aureobasidin A (AbA)是從絲狀真菌Aureobasidium pullulans R106中分離的一種環(huán)狀縮肽抗生素,在較低濃度下(0.1–0.5 μg/ml)即可對酵母產(chǎn)生毒性。對其敏感的真菌種類(lèi)包括釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、構巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger)。
AbA抑制酵母中AUR1基因(1,2)編碼的肌醇磷脂酰胺(inositol phosphorylceramide ,IPC)合成酶的活性,突變基因AUR1-C的表達使轉化酵母對AbA產(chǎn)生了抗性。Matchmaker Gold系統用這個(gè)基因作為蛋白質(zhì)互作研究的報告基因。
AbA篩選大大消除了僅用營(yíng)養報告基因(如HIS3)進(jìn)行低嚴緊度初篩時(shí)產(chǎn)生的背景克隆。由于A(yíng)bA可以直接殺死敏感的酵母菌株,而不是使菌株生長(cháng)延遲,所以基于A(yíng)bA的篩選有利于陽(yáng)性克隆的生長(cháng)和識別。一般實(shí)際操作中,用AbA進(jìn)行低嚴緊度初篩時(shí)會(huì )獲得很多克隆,之后再用Matchmaker Gold系統中的4個(gè)報告子(AUR1-C,HIS3, ADE2 和MEL1)進(jìn)行高嚴緊度的二次篩選以驗證陽(yáng)性克隆。
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■ 制品特點(diǎn)
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1. 用于酵母的嚴緊藥物篩選標記
2. AbA抗性是酵母雙雜交研究中理想的報告子
3. 篩選結果適用于Matchmaker Gold酵母單雜交和雙雜交系統
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■ 制品用途
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1. 酵母雙雜交研究
2. 酵母單雜交研究
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■ 屬性
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1. 分子量:1100 Da
2. 不溶于水
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■ 文獻
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1. Takesako, K. et al. (1993) J. Antibiot. (Tokyo) 46(9):1414–20.
2. Hashida-Okado, T. et al. (1996) Mol. Gen. Genet. 251(2):236–244.
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