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酵母雙雜交Y2H

均一化Mate & Plate文庫
品牌 Code No. 包裝量 價(jià)格 說(shuō)明書(shū) 數量
Clontech 630479 5×1 ml 13,781 元
Clontech 630486 5×1 ml 13,781 元
Clontech 630488 5×1 ml 13,781 元
Clontech 630484 5×1 ml 14,411 元
Clontech 630487 5×1 ml 13,781 元
Clontech 630485 5×1 ml 13,781 元
Clontech 630480 5×1 ml 13,781 元
Clontech 630481 2×1 ml 6,903 元
Clontech 630482 2×1 ml 6,903 元
Clontech 630483 5×1 ml 13,781 元
 
Code No. 產(chǎn)品名稱(chēng)
630479   Mate & Plate? Library - HeLa S3 (Normalized)
630486   Mate & Plate? Library - Human Brain (Normalized)
630488   Mate & Plate? Library - Mouse Brain (Normalized)
630484   Mate & Plate? Library - Mouse Embryonic Stem Cell (Normalized)
630487   Mate & Plate? Library - Universal Arabidopsis (Normalized)
630485   Mate & Plate? Library - Universal Drosophila (Normalized)
630480   Mate & Plate? Library - Universal Human (Normalized)
630481   Mate & Plate? Library - Universal Human (Normalized)
630482   Mate & Plate? Library - Universal Mouse (Normalized)
630483   Mate & Plate? Library - Universal Mouse (Normalized)
 
均一化的酵母雙雜交cDNA文庫——Normalized Mate & Plate
■ 制品說(shuō)明
Normalized Mate and Plate Libraries是高度復雜的cDNA文庫，文庫克隆到GAL4 AD載體上并轉化到酵母菌株Y187中。因為文庫擴增和酵母轉化操作已經(jīng)完成，所以使用這些文庫進(jìn)行雙雜交篩選更加省時(shí)省力。均一化處理降低了文庫中高豐度的轉錄本，低豐度及稀少的cDNA得以富集，這樣的文庫更加具有基因代表性，也使篩選操作更加簡(jiǎn)單，并大大降低了在篩選文庫時(shí)獲得假陽(yáng)性的可能性。 
· 操作僅需三步： 
1. 用Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System構建表達目的蛋白質(zhì)的酵母菌株。
2. 將bait菌株與1 ml均一化文庫混合過(guò)夜培養。
3. 鋪板于篩選培養基上。
· 什么是均一化文庫？ 
均一化處理降低了cDNA文庫中高豐度轉錄本所占的比例，這意味著(zhù)許多管家基因的拷貝數顯著(zhù)降低，所以篩選的克隆數更少，并且可以確保篩選到包含中等豐富和低等豐度轉錄本的克隆。簡(jiǎn)而言之，您可以花費較少的精力篩選到更多的獨立克隆，并有更大的機會(huì )檢測到重要的互作。
· 如何制備均一化文庫？
首先用SMART技術(shù)擴增獲得cDNA，之后用雙鏈特異性核酸酶（DSN）進(jìn)行均一化處理（1,2）。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，cDNA經(jīng)變性及退火后，用特異切割雙鏈DNA的酶快速酶切，因為cDNAs豐度越高退火越快，越有可能被酶降解。最后，用Northern blot方法分析cDNA均一化效率，將均一化的cDNA文庫克隆到prey載體pGADT7-RecAB上。
· 通用型文庫提供通用型基因覆蓋范圍
人和小鼠通用型文庫提供了廣泛且完善的表達基因覆蓋范圍。這些均一化通用型文庫來(lái)自于不同的齊全組織，這些特異挑選的組織能夠代表廣闊范圍內表達的基因（2）。結合“全面的”基因代表性及低拷貝cDNAs的富集度，Mate & Plate Universal (Normalized) Libraries為鑒定新的真實(shí)的互作提供了更大的可能。
· 為什么使用均一化通用型文庫? 
事實(shí)上，許多有意義的互作發(fā)生在位置適宜但表達較弱的蛋白質(zhì)之間，這類(lèi)互作用傳統的單一組織文庫不容易檢測到。通用型且均一化的文庫為這個(gè)問(wèn)題提供了有效的解決方法，因為這些文庫代表了平衡的轉錄本，能夠更大范圍的覆蓋表達的基因。因此，篩選不再局限于僅能鑒定出單一組織中高水平表達的蛋白質(zhì)之間的互作。
 
■ 制品特點(diǎn)
1. 為蛋白質(zhì)互作中的文庫篩選提供簡(jiǎn)便方法。
2. 篩選更少的克隆，檢測更多的互作。
3. 通用型文庫——更高的基因代表性。
4. 篩選不再大海撈針。
 
■ 制品用途
1. 酵母雙雜交文庫篩選。
 
■ 文獻
1. Zhulidov, P. A. et al. (2004) Nucleic Acids Res. 32(3):e37.
2. Shagin, D. A. et al. (2002) Genome Res. 12(12):1953-1942.
 
 
產(chǎn)品詳情請點(diǎn)擊以下鏈接：
http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Libraries/Mate_and_Plate_Normalized?sitex=10022:22372:US