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嵌合熒光法檢測(Takara)

TB Green® Premix DimerEraser? (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 包裝量 價(jià)格 說(shuō)明書(shū) 數量
Takara RR091Q 50 μl反應 × 40 次 525 元
Takara RR091A 50 μl反應 × 200 次 2,181 元
Takara RR091B (A × 2) 50 μl反應 × 400 次 4,144 元
 

 
■ 制品內容 (Code No.: RR091A: 50 μl反應×200次)
TB Green Premix DimerEraser (Perfect Real Time)(2X conc.)*1 1.0 ml × 5
ROX Reference Dye (50X Conc.)*2 200 μl × 1
ROX Reference Dye II (50X Conc.)*2 200 μl × 1
 

*1 內含TaKaRa Ex Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,TB Green。
*2 使用在A(yíng)pplied Biosystems Real Time PCR擴增儀上,用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。
◆ 使用如下儀器時(shí),添加ROX Reference Dye (50X):
· StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用如下儀器時(shí),添加ROX Reference Dye II (50X):
· Applied Biosystems 7500 Real Time PCR System
· Applied Biosystems 7500 Fast Real Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用如下儀器時(shí),不需要添加ROX Reference Dye:
· Thermal Cycler Dice Real Time System系列 (Code No. TP950/TP900/TP700 etc.)
· Smart Cycler System/Smart Cycler II System(Cepheid)
· LightCycler/LightCycler 480 System(Roche Diagnostics)

 
■ 制品說(shuō)明
本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專(zhuān)用試劑。制品中含有Real Time PCR反應的最適濃度TB Green,是一種2X 濃度的Premix Type試劑,進(jìn)行實(shí)驗時(shí),PCR反應液的配制十分方便簡(jiǎn)單。
本制品通過(guò)添加輔助蛋白質(zhì)和對Buffer組份的改良,使反應特異性比TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 更高。特別對影響嵌合法的主要因素的引物二聚體的產(chǎn)生有明顯抑制作用。本制品建議使用3 Step PCR作為標準流程,3 Step PCR反應時(shí)間稍長(cháng),但能有效抑制非特異性的PCR擴增。
本制品對微量模板濃度也有很高的靈敏度,可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線(xiàn),對靶基因進(jìn)行準確定量檢測,重復性好,可信度高。
 
■ 保存
4℃保存6個(gè)月。
避光保存,避免污染。
長(cháng)期保存請置于-80℃,勿存于-20℃。產(chǎn)品融解后請于4℃保存并在6個(gè)月內用完。
 
■ 試劑盒特長(cháng)
1. 適用于Real Time PCR反應,可以快速、準確地對目的基因進(jìn)行檢測、定量。
2. 在2X 濃度的Premix中,預先混有TB Green,PCR反應液配制時(shí),只需加入模板、引物、滅菌水便可進(jìn)行Real Time PCR反應,操作簡(jiǎn)單方便。
3. DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以進(jìn)行Hot Start法PCR反應,有效防止熱循環(huán)反應前由引物非特異性退火引起的非特異性擴增。同時(shí)制品中還添加了輔助蛋白,可以進(jìn)一步抑制PCR反應中由于引物的非特異性退火或引物二聚體等引起的非特異性擴增。

 
■ 使用注意
1. 使用時(shí)請上下顛倒輕輕均勻混合,避免產(chǎn)生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應不足。
a) 請勿渦旋振蕩混勻。
b) TB Green Premix DimerEraser (2X conc.) 在-80℃存放可能會(huì )產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,可用手掌溫度緩慢溶解于室溫避光放置,輕柔的上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
c) 沉淀會(huì )導致溶液成分不均一,使用前務(wù)必充分混勻試劑。
2. 請于冰上配制反應試劑。
3. 本制品中含有熒光染料TB Green,保存制品或配制PCR反應液時(shí)應避免強光照射。
4. 反應液的配制、分裝請一定使用新的 (無(wú)污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。