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[通知]
Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)產(chǎn)品的名稱(chēng)從2017年12月下旬開(kāi)始,將逐步變更為「TB Green系列」。產(chǎn)品Code、性能和原有產(chǎn)品相比沒(méi)有變化,請繼續放心使用。
產(chǎn)品名稱(chēng)將隨新lot的產(chǎn)品逐步變更,產(chǎn)品網(wǎng)頁(yè)或操作說(shuō)明書(shū)可能會(huì )先于產(chǎn)品標簽變更,望知悉!
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→詳情請點(diǎn)擊此處
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■ 制品內容 (Code No.: RR420A: 50 μl反應×200次)
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TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (2×Conc.)*1
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1.0 ml × 5
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ROX Reference Dye (50×Conc.)*2
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200 μl × 1
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ROX Reference Dye II (50×Conc.)*2
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200 μl × 1
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*1 內含TaKaRa Ex Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,TB Green。
*2 ROX Reference Dye是用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。例如使用Applied Biosystems的Real Time PCR擴增儀進(jìn)行實(shí)驗就需要校正。
◆ 需要使用ROX Reference Dye校正的儀器
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System
Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II校正的儀器
Applied Biosystems 7500和7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要校正的儀器
Thermal Cycler Dice? Real Time System III (Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (Code No.TP700/TP760)
Smart Cycler II System (Cepheid)
LightCycler/LightCycler 480 System (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
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Limited Use Label License:[M40], [M82]
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■ 制品說(shuō)明
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本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專(zhuān)用試劑。制品中含有Real Time PCR反應的最適濃度TB Green,是一種2×濃度的Premix Type試劑,進(jìn)行實(shí)驗時(shí),PCR反應液的配制十分方便簡(jiǎn)單。制品中使用了抗Taq抗體的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS,與Real Time PCR用適合Buffer組合,可以有效抑制非特異性的PCR擴增,大大提高PCR的擴增效率,可以進(jìn)行高靈敏度的Real Time PCR擴增反應。
另外,本制品中添加了Tli RNaseH(耐熱性RNaseH),以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應時(shí),可以很好地抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應造成的阻害作用。
本制品適合于快速Real Time PCR擴增反應,可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線(xiàn),對靶基因進(jìn)行準確定量、檢測,重復性好,可信度高。
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■ 保存
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4℃可保存6個(gè)月。
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避光保存,避免污染。
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-20℃運輸。
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長(cháng)期保存請置于-20℃。產(chǎn)品融解后請于4℃保存,并在6個(gè)月內用完。
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■ 試劑盒特長(cháng)
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1. 適用于Real Time PCR反應,可以快速、準確地對目的基因進(jìn)行檢測、定量。
2. 在2×濃度的Premix中,預先混有TB Green,PCR反應液配制時(shí),只需加入模板、引物、滅菌水便可進(jìn)行Real Time PCR反應,操作簡(jiǎn)單方便。
3. DNA聚合酶使用了改良后的TaKaRa Ex Taq HS,可以進(jìn)行Hot Start法PCR反應,再與Takara特別開(kāi)發(fā)的Buffer系統相結合,具有高擴增效率,高擴增靈敏度之特點(diǎn)。
4. 在2×濃度的Premix中,預先添加了耐熱性RNaseH (Tli RNaseH),可以很好地抑制以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應時(shí),由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應造成的阻害作用。
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■ 注意事項
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1. 使用前,請上下輕輕顛倒混勻,避免產(chǎn)生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應效果不佳。
(1) 請勿渦旋振蕩混勻。
(2) TB Green Premix Ex Taq (2× conc.) 在-20℃存放可能會(huì )產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,可用手握緩慢溶解,于室溫短時(shí)間避光放置,輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會(huì )導致溶液成分不均勻,使用前務(wù)必充分混勻試劑。
2. 配制反應液時(shí),試劑請于冰上放置。
3. 本制品中含有熒光染料TB Green,配制PCR反應液時(shí)應避免強光照射。
4. 反應液的配制、分裝請一定使用新的 (無(wú)污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
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