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■ 制品內容 (Code No.: RR350A)
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SapphireAmp Fast PCR Master Mix (2×Premix)
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1 ml × 4
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dH2O
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1 ml × 4
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■ 制品說(shuō)明
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SapphireAmp Fast PCR Master Mix是適合于快速PCR (延伸速度為10 sec./kb) 反應用試劑 (酶、Buffer、dNTP Mixture等) 的2倍濃度的預混型制品，DNA Polymerase使用了性能良好的Hot Start酶。并且，本制品中已含有電泳時(shí)所必需的色素試劑 (遷移速度不同的兩種藍色色素)，PCR反應后可以直接進(jìn)行電泳。使用本制品時(shí)，只需要在制品溶液中加入模板和引物便可以進(jìn)行PCR反應，PCR反應結束后即可直接電泳觀(guān)察結果，簡(jiǎn)化了操作步驟。
使用本制品直接進(jìn)行菌落PCR檢測插入片段 (推薦擴增低于5 kb片段)，短時(shí)間內可以得到實(shí)驗結果 (5 kb片段擴增所需時(shí)間約為1小時(shí)15分鐘) 。以人基因組DNA為模板可以擴增6 kb的DNA片段。
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■ 保存
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-20℃ (4℃可以保存3個(gè)月)。
反復凍融活性可能降低，使用頻率高時(shí)，融解后請于4℃保存，使用前顛倒混勻，輕輕離心后使用。
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■ 用 途
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1. PCR法擴增DNA。
2. 菌落直接PCR。
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■ PCR反應性能
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以人基因組DNA為模板，可以很好擴增6 kb的DNA片段。
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■ 電泳時(shí)色素Marker位置
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反應液5 μl，1% TaKaRa Agarose L03 [TAKARA] (Code No. 5003) 電泳時(shí)，兩種藍色色素分別在1 kb和3～5 kb附近，分別在260 nm和620 nm處有吸收峰。如果需要，可通過(guò)使用NucleoSpin® Gel and PCR Clean-Up (Code No. 740609.50/.250)或切膠回收來(lái)去除染料進(jìn)行DNA純化。
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■ PCR產(chǎn)物
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使用本制品擴增得到的PCR產(chǎn)物3’端附有一個(gè)“A”堿基，因此可直接克隆于T-Vector中。也可以在末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端載體。
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