本制品是Pyrococcus Sp.由來(lái)的具有3′→5′Exonuclease (Proof reading活性) 的耐熱性α型DNA聚合酶。與Pol I 型DNA聚合酶 (Taq DNA Polymerase等) 相比,α型DNA聚合酶具有PCR適用范圍窄、最適反應條件難以確定等缺點(diǎn)。而Pyrobest DNA Polymerase所使用的Buffer已被優(yōu)化,與Taq DNA聚合酶具有相同的擴增效率 (可擴增人基因組DNA約6 kb和λ DNA約12 kb大小的片段)。另外,Pyrobest DNA Polymerase具有3′→5′Exonuclease活性可以把錯配的堿基除去,不僅適用于高保真性的PCR反應,還具有很高的反應性能。
目前使用的10×Pyrobest Buffer II同原來(lái)使用的10×Pyrobest Buffer相比,大大提高了PCR反應性能。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 起源
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Escherichia coli carrying a plasmid that encodes the Pyrococcus sp. DNA polymerase gene.
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■ 活性定義
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用活性化的大馬哈魚(yú)精子DNA作為模板/引物,在74℃,30分鐘內,攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個(gè)活性單位 (U)。
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■ 純度
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10 U的本酶和0.6 μg的λ-Hind III、0.6 μg的Supercoiled pBR322 DNA或0.6 μg的λ DNA在74℃下反應1小時(shí),均未檢出內切酶和外切酶活性。
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