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■ 制品內容 (Code No.: R010A)
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PrimeSTAR HS DNA Polymerase (2.5 U/μl)
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100 μl
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5×PrimeSTAR Buffer (Mg2+ plus)*
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1 ml × 2
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dNTP Mixture (各2.5 mM)
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800 μl
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*Mg2+ 濃度為5 mM(5×)
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Limited Use Label License: [M54]
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■ 制品說(shuō)明
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PrimeSTAR HS DNA Polymerase是Takara Bio特別開(kāi)發(fā)的兼具高保真性和高擴增效率的PCR用DNA聚合酶。因其具有非常強的3’→5’Exonuclease活性而顯示出很好的校正功能，同時(shí)還具有優(yōu)于Taq DNA Polymerase的高擴增效率。制品中添加了在常溫狀態(tài)下能夠抑制DNA Polymerase活性及3’→5’Exonuclease活性的抗體，有效防止PCR反應前的引物錯配和引物消化。此外，因其還具有很強的Priming效率，可以設定較短的退火時(shí)間，從而縮短了反應時(shí)間。與最適反應Buffer配合使用，可以實(shí)現對廣泛靶序列的高保真性、高靈敏度、高特異性、高成功率的擴增，對于cDNA克隆等要求高保真的PCR反應發(fā)揮強大的威力。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 特 點(diǎn)
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1. 保真性能非常高的DNA聚合酶。
2. 很好的PCR擴增效率，對GC rich模板也能進(jìn)行高效率、高保真擴增。
3. 使用的PCR反應條件具有廣譜性，即同一PCR反應條件適用的PCR擴增長(cháng)度范圍廣,可提高實(shí)驗成功率，對從cDNA或基因組文庫中進(jìn)行復數克隆的PCR擴增特別適合。
4. 本制品為添加單克隆抗體的Hot Start型DNA聚合酶，可以實(shí)現高特異性PCR擴增。同時(shí)，本制品還具有高退火效率，不僅可以節省反應時(shí)間，還可以提高反應特異性。
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■ 幾種高保真DNA聚合酶的保真性能比較
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以Thermus thermophilus HB8 genomic DNA為模板，任選8個(gè)富含CG的區域（各約500 bp），使用PrimeSTAR HS及其他幾種不同高保真酶進(jìn)行PCR擴增后，將各自PCR產(chǎn)物克隆到合適的載體中，并對每種序列挑取復數的克隆進(jìn)行測序。圖1顯示了比較結果：
分析使用PrimeSTAR HS擴增的DNA片段序列，249,941個(gè)數據中只有12個(gè)數據顯示錯配。
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圖1 幾種高保真DNA聚合酶的保真性能比較
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