本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反轉錄反應試劑。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反轉錄反應所需的所有試劑 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應Buffer)，加入模板RNA和水即可迅速進(jìn)行反應。使用具有較強延伸能力的PrimeScript RTase，與制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同，可以在較短時(shí)間內高效合成Real Time PCR用模板cDNA。 本制品合成的cDNA可以用于SYBR® Green qPCR分析法和探針?lè )治龇?，可以根據?shí)驗目的與SYBR Premix Ex Taq? II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 、SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量試劑配合使用，能夠進(jìn)行高性能的基因表達分析。
注意：Takara Bio使用SYBR Green I 作為研究試劑已得到Molecular Probes Inc.的許可。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 試劑盒特長(cháng)
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1. 制品為預先混好的Premix形式，只需加入模板RNA和水便可以開(kāi)始反應。
2. 可以在較短時(shí)間內高效合成Real Time PCR用cDNA，是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應的理想試劑。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉錄引物，可以合成適合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立標準曲線(xiàn)，建立標準曲線(xiàn)的條件就是需要將總RNA和反轉錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時(shí)，由于模板濃度低不穩定，因而會(huì )縮小曲線(xiàn)范圍，結果精度降低。本制品中附加了標準曲線(xiàn)制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR)，將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準確稀釋?zhuān)菀自趯拸V范圍內獲得準確定量的標準曲線(xiàn)。
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■ 注意事項
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1. 5×PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地離心收集到反應管底部。由于5×PrimeScript RT Master Mix粘度高，用移液槍慢慢反復吸打充分混勻后使用。
2. 分裝試劑時(shí)務(wù)必使用新的槍頭 (Tip)，以防止樣品間污染。
3. 本制品中已經(jīng)加入了反轉錄Primer（Oligo dT Primer 和Random 6 mers），如果要使用Gene Specific Primer進(jìn)行反轉錄反應，則不能使用本制品。
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